农药残留检测方法与步骤

农残检测

检测方法：酶抑制法

依据标准：国标GB/T 5009.199-2003

检测仪器：RS-PR-24农药残留快速检测仪

试剂配置

准备：纯净水/蒸馏水（不能用矿泉水/山泉水）、缓冲液。

显色剂：加11毫升缓冲液，粉末溶解、混匀即可。

底物：加11毫升纯净水，粉末溶解、混匀即可。

酶：不用另配，可直接使用。

  样品前处理

1.所有备检样品在检测前无需进行水洗，否则影响数据准确度。

2.叶菜类：至少取不同株上的5片叶片叠加，剪成1cm见方秤取2g，加10ml提取液。

3.颜色深叶菜类：对一些叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株蔬菜浸提方法，减少色素干扰。

4.非菜叶类：取果实的表皮，至少4克。用刀从上而下沿表面，削取一片，为增加检测代表性，从不同的3个果实上削取一片，剪成1cm²大小，称取4g。

5.豆类：用刀切片，其中毛豆去壳后检测，在浸泡中会有部分白色外皮浸出，检测液需进过滤。

6.水果类：如葡萄、提子、杨梅，整颗提取，取1颗，加提取液10ml，震荡提取5分钟，中间将样品用玻璃棒转位置，使样品各表面充分接触提取液。提取后取2.5ml上清液，再按正常步骤检测。

 特殊样品前处理

部分样品，如葱，蒜，萝卜，韭菜，芹菜，香菜，以及番茄汁液中含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，处理这类样品的时候，可采取整株处理蔬菜浸泡或淋洗。

 操作步骤

  结果判定

1.△Ac值一定要＞0.3，否则计算出来的样品抑制率是错误的，这种情况请重做实验。

（Ac值＜0.3的原因：1、操作问题，加样量不准确 2、酶温度太低，或酶失去活性）

2.根据国家标准GB/T5009.199-2003要求，当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上，确保不是操作问题而导致的假阳性。如有必要，可用气相色谱等方法作进一步确认。

3.阳性样品复检，在添加样品名称时，需把样品编号改成初检编号，初检编号可在“查询”中查看。

4.如需打印数据，请在农残仪页面未清空时打印。页面清空后无法打印之前的数据。可在“查询”，看数据是否已上传。

5.如果需要重新做实验：清空->关上盖子->不放入比色皿，按“通道初始化”

如果需要添加菜名：设置->样品名称->添加

如果需要修改服务器：设置->数据中心->更改->确定

  检测结果处理

1.阴性结果：结果为阴性时，可直接上传至系统；

2.阳性结果：结果为阳性时，检测样品复检多一次，如复检结果为阴性，则可直接上传数据；如复检结果还是为阳性时，则数据上传后，检测样品做退换货处理，并做好退换货记录备查。

注意事项

1.平时试剂需要放在2~8℃保存，缓冲液可直接放在室温保存，配制好的试剂在使用前，要先恢复到室温，否则会影响结果的准确性，试剂使用前请摇匀。

2.比色皿为易碎材质，需要小心保管，同时实验过程中，请勿碰触比色皿的光滑面，以免影响结果的准确性。

3.试剂避免交叉污染，取出后的试剂不可再打回瓶内。

4.酶配制后经常用10天内用不完的，建议分装为两瓶保存，以避免酶因反复解冻而降低其活性。

5.每加一次试剂，移液器的枪头都必须更换，避免试剂污染。

6.处理色素含量较高的果蔬样品，应采取整株（体）浸提，尽量避免过多色素浸出，干扰测定。若实验室有条件，对色素干扰严重的过滤液,可用活性碳脱色处理.过滤或离心后，取清液作为待测液。

7.葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株浸提，避免次生物质干扰。